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牙周炎患者治疗前后龈沟液中可溶性细胞间粘附分子－1的变化

2012-08-30 来源: 实用口腔医学杂志访问量:68 次在线投稿

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〔摘要〕　目的：了解成人牙周炎患者治疗前后龈沟液（GCF）中可溶性细胞间粘附分子-1（sICAM-1）含量的变化。方法：采用常规滤纸条法收集正常成年人以及成年人牙周炎患者治疗前后的GCF样本，用ELISA法检测其sICAM-1的含量。结果：治疗后GCF中sICAM-1的水平显著下降（P<0.001）。结论：GCF中sICAM-1水平可作为评价牙周炎症状态的一项较为敏感和客观的实验指标。
关键词　牙周炎；龈沟液；可溶性细胞间粘附分子-1

　　在以前的实验中，我们已证实了龈沟液中有sICAM-1的存在，并且其含量在牙周健康者、边缘性龈炎以及成人牙周炎患者中呈上升趋势（结果将另文讨论）。然而对于重度成人牙周炎患者治疗前后，龈沟液中的sICAM-1的变化规律尚不清楚，因此本研究将对重度成人牙周炎患者治疗前后龈沟液中sICAM-1的含量进行监测，以了解GCF中sICAM-1水平变化与临床症状的关系，用于指导临床治疗。

1　材料和方法

    1.1　病例选择
　　从我科门诊患者中采取完全随机抽样方法选择研究对象11人，全部研究对象要求全身健康，无系统性疾病，3个月内未使用过抗生素，半年内无牙周治疗史，妇女未妊娠。根据临床检查情况分为2组（每人各选择2～4个牙齿，分别位于4个不同象限）：牙周健康组（H ）5人（17个牙）；重度成年人牙周炎组（AP）6人（13牙），该组受检牙要求牙周袋深度（PD）>4 mm ，牙槽骨吸收量>根长的1/2。2组平均年龄分别为28.7岁和53.8岁。
    1.2　临床检查项目
　　除检测菌斑指数〔plaque index，PLI，按Silness和Lue（1964）分4度记录〕、出血指数〔blee ding index，BI，按Mazza（1981）分6度记录〕外，还按照口腔内科学中介绍的方法，测定牙周探诊深度（probing depth，PD）和附着丧失（attachment loss，AL），并对患牙进行X线根尖片检查，所有患者的检查均由同一人完成。
    1.3　GCF的收集
　　采用常规滤纸条法取样，将牙隔湿并去除龈上菌斑，将3个已用分析天平称重的定量滤纸条（2 mm×8 mm）分别放在该牙的唇（颊）侧近中、远中和******牙周袋口30 s后取出（若有血迹则弃去另选一牙）。将3个定量滤纸条作为一个样本，取出后再称重，减去原重量，与比重（约1 mg/μl）换算成体积（μl）。称重后样本立即放入微离心管中， -70 ℃冻存。在对重度成人牙周炎患者进行牙周治疗后1周、4周再分别取样一次，并记录各项牙周临床指标，所取样本在两个月内完成定量分析。
    1.4　治疗方法
　　采用龈上、龈下洁治，调整咬合，牙周袋内放置甲硝唑药条等局部治疗方法，并同时给予口服利君沙、灭滴灵和牙周宁。
    1.5　GCF中sICAM-1的检测
　　从-70 ℃中取出样本，室温解冻，每管中分别加入一定量的体积分数为0.05％ Tw een-20洗提液，使之成为1∶100的定比稀释液，室温摇床中（150±20） r/min（r=5 cm）放置 1 h，4 ℃、10 000 r/min（r=5 cm）离心10 min，取上清液。利用ICAM-1试剂盒，用EL ISA法对上清液进行检测。
    1.6　统计学处理
　　用SPSS统计软件包对数据进行处理。

2　结　果

　　在对2组GCF-sICAM-1的表达水平的比较中发现，与健康组相比，AP组的sICAM-1 的表达明显增强，差异存在着显著性（P<0.001），结果见表1。

表1　2组受检牙GCF中sICAM-1的比较　　　（kU/L）

　重度成人牙周炎患牙治疗前后牙周各项指标的追踪检查可见，治疗后牙周临床症状有明显的改善，除AL外，其余指标均显著下降（P<0.01），这表明BI、PD及PLI能较好地反应牙周炎症状况。各项牙周指标的变化情况见表2。
表2　AP组治疗前后各项牙周指标的比较

治疗后GCF中sICAM-1的水平明显下降，在治疗1周时，GCF-sICAM-1的水平由治疗前的均数272.07 kU/L下降为141.42 kU/L，这种变化与牙周各项临床指标的变化相一致。治疗前后GCF中sICAM-1的水平变化见表3。
3　讨　论

　　细胞间粘附分子(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)是介导细胞间粘附的重要功能分子，它能调节炎症信息的传递，参与机体的免疫调节，促进白细胞在炎症或损伤部位的聚集，影响T细胞、B细胞的活化及其效应〔1 〕。近年来国外一些研究已证实细菌脂多糖能诱导牙周组织ICAM-1的高度表达〔2〕，而ICAM-1表达的增强能促进白细胞在牙周炎症区的聚集和活化，是牙周局部炎症反应的前提和基础，无论在边缘性龈炎或慢性牙周炎的病损中，都存在随着ICAM-1表达水平的增高，相应的炎症程度也随之加重的现象〔3,4〕。但对sICAM-1在牙周炎发生、发展、转归过程中的变化情况，目前尚不完全清楚。

表3　不同取样时间里sICAM-1水平的变化　(kU/L)

    sICAM-1是膜型ICAM-1通过蛋白酶裂解作用而脱落产生的，其总体结构与膜型ICAM-1的胞外区结构非常相似，在调节淋巴细胞功能相关分子-1(LFA-1)依赖的白细胞粘附中有着重要的生理功能〔5〕。1998年Mole 〔6〕首先报道证实了牙周病患者龈沟液中sICAM-1的变化情况，指出牙周病患者牙周组织中高度表达的ICAM-1可脱落形成龈沟液中的sICAM-1，而且随着牙周组织炎症状态的加强，龈沟液中sICAM-1的含量亦明显增加。本研究的结果也发现AP组受检牙龈沟液中sICAM-1的含量显著高于H组(P<0.001) ，而随着治疗后牙周临床症状的改善，GCF中sICAM-1的表达明显减少，其下降的变化趋势与牙周临床指标相一致。可见牙周局部洁治不但能去除牙周菌斑，而且能影响龈沟液中sICA M-1的表达，使牙周炎症信息的传递不会迅速扩大，从而缓解了牙周局部过度的炎症反应和免疫反应。
　　研究中显示AP患者治疗后1周，GCF中sICAM-1的含量已有明显的减少，而治疗1月后，龈沟液中sICAM-1的水平仍持续下降。①可能是因为原来生成的ICAM-1和sICAM-1继续消耗， ②可能是由于牙周局部治疗改变了牙周致病菌的微生态环境，使细菌的粘附、繁殖、聚集能力受到影响，再附着的致病菌减少，因此牙周组织细胞受细菌毒素侵袭而表达的ICAM-1数量明显下降，脱落而形成的sICAM-1也进一步减少。但此时GCF中sICAM-1的含量仍高于H组水平，这说明牙周局部治疗虽大量去除了牙周致病菌，缓解了牙周组织过度的炎症反应和免疫反应，然而却不能在短期内使牙周组织完全恢复正常，因此对重度牙周炎患者进行追踪治疗和疗效监测是十分必要的。
　　本研究从重度牙周炎患者治疗前后龈沟液中sICAM-1的水平变化角度，探讨了在牙周炎症过程当中，sICAM-1的含量变化与牙周临床症状的相互关系，为将龈沟液中sICAM-1的水平作为牙周炎活动的特异性指标提供了必要的实验依据，并有利于临床疗效的评价。
    作者单位：唐倩（广东中山医科大学口腔医学院 510630）
    梁焕友（广东中山医科大学口腔医学院 510630）
    刘穗芳（广东中山医科大学口腔医学院 510630）
    刘国萍（广东中山医科大学口腔医学院 510630）

参考文献

1，Hynes RO,Lander AD.Contact and adhesive specificities in the associatio n,migrations,and targeting of cells and axons.Cell,1993,68(2):303
2，Hayashi J,Masaka T,Saito I,et al.Soluble CD14 mediates lipopolysaccharide -induced intercellular adhesion molecule 1 expression in cultured human gingiva l fibroblasts.Infect Immun,1996,64(12):4946

3，Hayashi J,Saito I,Ishikawa I,et al.Effects of cytokine and periodontopathi c bacteria on the leukocyte function associated antigen 1/intercellular adhesion molecule 1 pathway in gingival fibroblasts in adult periodontal disease.Infect Immun,1994,62(12):5205
4，唐倩综述,梁焕友审校.细胞间粘附分子在牙周组织的分布及其意义.国外医学口腔医学分册,1998,25(4):232
5，Rothlein R,Mainolfi EA,Czajkowski M.A form of circulating ICAM-1 in human ser um .J Immunol,1991,147(1):3788
6，Mole N,Kennel de March A,Martin G,et al.High levels of soluble intercellul ar adhesion molecule-1 (ICAM-1) in crevicular fluid of periodontal disease pat ients with plaque.J Clin Periodontol,1998,25(9):754

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